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人胚胎干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基P04-77120K適用于人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng),即用型PowerStem HPSC。
人胚胎干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基P04-77120K儲(chǔ)存方法:2-8℃
應(yīng)用:
應(yīng)用于人來源的T細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增,培養(yǎng)基需要添加刺激性抗體和細(xì)胞因子,另外每升培養(yǎng)基需要添加20ml 200mM的L。
操作:
平板培養(yǎng):
1. 按照已確定的方法來準(zhǔn)備新鮮或者凍存的 PBMNCs (外周血單個(gè)核細(xì)胞)
2. 用血計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量
3. 轉(zhuǎn)移適當(dāng)數(shù)量的細(xì)胞到含有培養(yǎng)基(已加入細(xì)胞因子和刺激抗體)的培養(yǎng)瓶中
4. 把培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中, 37°C , 5% CO2 培養(yǎng).
產(chǎn)品特性:
Nobimpex 無血清 T 細(xì)胞培養(yǎng)基 (Product number N103-1000) 已經(jīng)經(jīng)過嚴(yán)格的測試可用于 PBMNC 中的 T 細(xì)胞擴(kuò)增。本產(chǎn)品已與其他幾種商業(yè)化可用的無血清培養(yǎng)基做了 T 細(xì)胞擴(kuò)增比較。實(shí)驗(yàn)中,200,000 PBMNCs/ml 在本產(chǎn)品和另一商業(yè)化培養(yǎng)基中培養(yǎng) 7 天,培養(yǎng)基含有 100 IU/ml IL-2 和 anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗體。.
實(shí)驗(yàn)中擴(kuò)增的 T-細(xì)胞使用 51 鉻釋放分析來測試細(xì)胞溶解能力。靶細(xì)胞 (K562, 人慢性白血病細(xì)胞), 使用 51 鉻標(biāo)記并連接到 anti-CD3 (OKT3) Fc 受體.。當(dāng)與效應(yīng)或者細(xì)胞毒 T 細(xì)胞混合時(shí),,靶細(xì)胞就會(huì)凋亡或者溶解,并釋放 51 鉻.。上清中 51 鉻的釋放量與靶細(xì)胞的死亡及功能 T 細(xì)胞的數(shù)量成正比。
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